Технология проведения анализа | femoflor



Технология проведения анализа

Материалом для проведения исследования Фемофлор является соскоб эпителиальных клеток из влагалища, уретры или цервикального канала. Взятие материала, как и в случае стандартных анализов на ИППП, проводят в транспортную среду для взятия биопроб (специализированные транспортные среды или физ.раствор). Рекомендуем проводить маркировку первичных пробирок в лаборатории еще до взятия биологического материала.

Взятый материал хранят в течение суток при температуре плюс 4°С, если необходимо хранить дольше, то нужно центрифугированием (10 мин, 14 000 об/мин) получить осадок клеток, отобрать надосадочную жидкость приблизительно до 50 мкл и заморозить при температуре минус 20° С. В замороженном состоянии материал можно хранить один месяц.

ДНК выделяют из образцов стандартными методиками, как и для рутинных исследований на ИППП:

  • сорбентной «Проба-ГС-Плюс» (производства компании «ДНК-Технология» с увеличенным объемом элюирующего буфера)
  • методикой, основанной на преципитации «Проба-НК-Плюс» (производства компании «ДНК-Технология» с увеличенным объемом элюирующего буфера).

Увеличенный объем буфера нужен в связи с тем, что для проведения исследования Фемофлор-16 необходимы минимум 80 мкл раствора ДНК (16 пробирок * 5 мкл). Для этой стадии рекомендуем оснастить рабочее место колбой-ловушкой для повышения технологичности процесса.

Обратите внимание на то, что наборы реагентов Фемофлор выпускают в раскапанном виде в стрипованных пробирках 0,2 мл, следовательно, на стадии приготовления реакционной смеси Вам понадобится штатив «рабочее место» и ротор на микроцентрифугу-вортекс для таких пробирок.

Как и для рутинных анализов, в каждую пробирку нужно добавить по 10 мкл раствора полимеразы (входит в набор), каплю минерального масла, 5 мкл ДНК выделенного из образца, затем осадить капли центрифугирование на микроцентрифуге-вортексе.

Затем стрипованные пробирки нужно поставить в прибор, запустить программное обеспечение, выбрать оператора, подключиться к прибору, заполнить протокол и запустить процесс амплификации.

По завершении амплификации ПО предложит перейти к анализу полученных данных.